一、肿瘤免疫治疗的时代背景与核心挑战。免疫检查点抑制剂Immune Checkpoint Inhibitors, ICI的临床应用标志着肿瘤治疗范式的根本性转变部分患者通过该疗法实现了肿瘤的长期免疫控制展现出持久性的临床获益。然而肿瘤免疫逃逸的复杂机制依然构成重大障碍如何拓展获益人群范围并开发更为有效的联合治疗方案始终是免疫肿瘤学Immuno-Oncology, I-O领域的核心命题。当前联合治疗策略正逐步成为研究的主流方向其根本目标在于协同增强抗肿瘤免疫应答效能或针对肿瘤微环境Tumor Microenvironment, TME中的多重免疫抑制组分进行定向干预。二、NK细胞在抗肿瘤免疫中的功能定位与调控机制。自然杀伤细胞Natural Killer cells, NK cells作为固有免疫系统的关键效应群体近年来已跻身多种免疫治疗策略的前沿。NK细胞的效应功能受其表面激活性受体与抑制性受体所传递信号的整合调控同时亦受到微环境中细胞因子网络的深刻影响例如IL-12、IL-15、IL-18及TGF-β等均参与其功能状态的精细调节。在实体瘤背景下NK细胞面临着免疫抑制性TME的严峻挑战包括代谢竞争、抑制性细胞因子浸润以及抑制性受体的持续刺激这些因素共同驱动NK细胞走向耗竭与功能失调。此外NK细胞向实体瘤组织内部的有效浸润能力相对有限亦是制约其疗效的重要瓶颈。因此NK细胞的过继转移策略包括异基因NK细胞与CAR-NK细胞亟需与其他治疗手段有机整合以恢复并增强NK细胞的抗肿瘤效应功能。三、NKG2D受体的结构特征与表达谱。NKG2DNatural Killer Group 2, member D亦称为CD314或KLRK1是由KLRK1基因编码的II型跨膜糖蛋白归属于C型凝集素样受体家族。从结构生物学角度而言NKG2D由三个功能域构成胞质区第1-51位氨基酸、跨膜螺旋区第52-72位氨基酸以及胞外凝集素样结构域第73-216位氨基酸其中胞外结构域负责识别配体但其缺乏典型C型凝集素所需的钙离子结合位点介导的是蛋白质-蛋白质相互作用而非糖类配体识别。NKG2D在体内以二硫键连接的同源二聚体形式存在并可进一步与四个DAP10适配蛋白亚基组装为异源六聚体复合物该组装对于NK细胞表面的稳定表达和细胞毒性信号的启动至关重要。NKG2D主要表达于NK细胞、NKT细胞、CD8 αβ T细胞、γδ T细胞以及活化的巨噬细胞亚群。在NK细胞中NKG2D作为激活性受体能够直接触发细胞毒效应而在CD8 T细胞中NKG2D则主要发挥共刺激受体的功能用于增强T细胞受体TCR介导的活化信号。人源NKG2D仅与DAP10适配蛋白偶联通过其胞内YINM基序招募磷脂酰肌醇-3激酶PI3K的p85亚基从而启动下游信号级联反应。四、NKG2D配体的家族成员与表达调控。在人类基因组中目前已鉴定出8种不同的NKG2D配体NKG2DL均属于MHC I类分子的同源物。其中最为经典的配体为由MICA和MICB基因编码的蛋白质这两个基因定位于MHC基因座内呈现高度的多态性特征。其余6种配体属于UL-16结合蛋白ULBP家族亦称维甲酸早期转录物RAET家族分别命名为ULBP-1至ULBP-6。在正常生理条件下NKG2DL在健康组织中的表达受到严格调控表达水平极低从而避免自身免疫损伤的发生。然而在肿瘤转化、DNA损伤应答、热休克或病毒感染等应激条件下NKG2DL在肿瘤细胞表面呈现显著上调。MICA在肺癌、结直肠癌、胃癌、肝癌及乳腺癌等多种恶性肿瘤中呈现高表达。但是肿瘤细胞亦进化出多种逃逸策略以破坏NKG2D/NKG2DL轴的免疫监视功能其中包括通过金属蛋白酶MMP介导的蛋白水解脱落释放可溶性MICAsMICA和sMICB这些可溶性配体可与NKG2D结合并诱导其内化和降解从而系统性削弱NK细胞的效应功能。五、靶向NKG2D/NKG2DL轴的免疫治疗策略。基于NKG2D/NKG2DL轴在肿瘤免疫监视中的核心地位靶向该信号轴的多种治疗干预策略正处于积极研发阶段。第一单克隆抗体介导的ADCC效应。 利用NK细胞介导的抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用ADCC开发靶向MICA/B的抗体是目前的主要方向之一。部分抗MICA/B单克隆抗体如7C6、6E1通过识别MICA/B的α3结构域能够有效抑制其蛋白水解脱落稳定肿瘤细胞表面的配体表达从而恢复NKG2D依赖性NK细胞介导的肿瘤清除功能。第二CAR-NK与CAR-T细胞治疗。 工程化表达NKG2D胞外结构域的CAR-T细胞和CAR-NK细胞已在临床前和早期临床研究中展现出增强的抗肿瘤效应。在结直肠癌患者的初步研究中CAR-NK细胞已观察到肿瘤消退和临床改善的迹象。第三联合治疗策略的协同增效。 目前的研究重点正逐渐转向联合用药策略。组蛋白脱乙酰酶抑制剂HDACi、蛋白酶体抑制剂如Bortezomib、PARP抑制剂以及STING激动剂等药物已被证实能够上调肿瘤细胞表面NKG2DL的表达水平从而增强肿瘤细胞对抗MICA/B抗体及NK细胞介导杀伤的敏感性。此外TGF-β信号的抑制可通过恢复NK细胞表面NKG2D和NKp30的表达逆转免疫抑制效应。这些联合策略均指向同一目标——重塑TME将免疫冷肿瘤转化为热肿瘤释放NK细胞和细胞毒性CD8 T细胞的抗肿瘤潜能。