摘要SCFStem Cell Factor干细胞因子是造血干细胞维持与扩增、iPSC分化、免疫细胞培养以及CAR-T/CAR-NK等CGT工艺开发中常用的重要细胞因子。对于细胞治疗和长期培养体系而言SCF并不是“有就行”的普通试剂其纯度、活性、批次一致性、动物源成分、载体蛋白情况和内毒素控制等因素都会影响细胞扩增效率、干细胞表型稳定性、分化结果一致性和后续工艺放大。本文围绕Qkine SCFQk078的技术特点结合SCF/c-kit信号通路及细胞培养应用场景梳理CGT研发中选择SCF细胞因子时需要关注的关键指标。关键词SCF、干细胞因子、细胞治疗、CAR-T、iPSC、高纯度细胞因子、无动物源细胞因子、Qkine、造血干细胞、CGTSCF在细胞治疗和干细胞培养中的作用SCFStem Cell Factor是骨髓微环境中造血干细胞HSC维持和扩增的关键因子也是干细胞培养体系中非常重要的一类细胞因子。它通过结合c-Kit受体参与调控造血干细胞HSC存活与扩增、神经干细胞培养、iPSC分化过程、NK细胞和免疫细胞生产、CAR-T/CAR-NK生产流程以及基因与细胞治疗CGT工艺开发等多个方向。随着细胞治疗、免疫细胞治疗、iPSC衍生细胞产品和HSC相关研究持续发展SCF在培养体系中的意义已经不仅是“提供一个生长因子信号”而是成为影响细胞状态、培养效率和工艺一致性的关键变量之一。对于这些应用来说SCF并不是“有就行”的试剂。如果批次差异较大、纯度不足、活性不稳定或者含有较多杂蛋白和不必要的外源成分都可能影响细胞扩增效率、干细胞表型稳定性、分化结果一致性、GMP工艺开发以及后续工艺放大和技术转移。尤其是在长周期培养、IND申报前研究、无血清培养体系和细胞治疗级工艺开发中细胞因子的质量差异可能会被持续放大最终影响实验重复性和工艺可解释性。因此对于SCF这类关键细胞因子研究人员通常需要同时关注纯度、活性、稳定性、批次一致性、动物源成分、载体蛋白、内毒素水平和质量文件等多个维度。Qkine团队围绕SCF生产工艺进行了持续优化其目标并非仅获得一个可销售的重组蛋白产品而是建立一个能够长期稳定支持细胞治疗开发和干细胞培养研究的高质量SCF体系。Qkine SCFQk078围绕高纯度、高活性、高一致性、无动物源、无载体蛋白等特点进行设计更适合用于HSC扩增、iPSC分化、免疫细胞培养和CGT工艺开发等对细胞因子质量要求较高的场景。更多围绕Qkine生物活性蛋白和细胞因子的技术资料也可以参考Qkine生物活性蛋白与细胞因子资料页面。Qkine SCFQk078的核心技术特点Qkine SCFQk078的一个重要特点是高纯度。根据资料显示其SDS-PAGE定量分析纯度98%杂蛋白含量较低有助于降低实验背景干扰。对于HSC扩增、NK细胞培养和iPSC培养过程而言纯度并不只是一个产品参数而会影响培养体系中的变量数量和数据解释难度。很多研究人员会发现同样标称浓度的SCF不同来源产品的效果可能存在明显差异原因往往并不只是浓度本身而可能与生物活性、蛋白纯度、聚集体含量、制备工艺和保存稳定性等因素有关。批次一致性也是SCF在细胞治疗工艺开发中需要重点关注的指标。对于短期验证实验来说单个批次的表现可能已经足够完成初步观察但对于工艺开发、长周期培养、IND申报前研究和后续放大验证而言不同批次细胞因子是否能够产生相对一致的生物学效应非常关键。Qkine在表达工艺、纯化工艺和质控体系方面进行了优化目标是让不同批次SCF能够获得一致的生物学效果。对于希望建立可复制培养流程的研究团队来说细胞因子批次一致性往往比单纯比较采购成本更有意义。Qkine SCFQk078还具有无动物源Animal-Origin-FreeAOF的特点。完全无动物源成分有助于降低潜在病原体风险、减少监管顾虑并更容易向CGT工艺开发和细胞治疗相关体系过渡。随着细胞治疗行业对原材料来源、风险控制和工艺可追溯性的关注提升无动物源成分已经成为很多培养体系优化中的重要趋势。对于需要向无血清、无动物源或更明确成分体系过渡的研究方向来说AOF细胞因子可以减少不必要的外源变量。另一个值得关注的特点是无载体蛋白Carrier-Protein-Free。很多重组蛋白产品会加入BSA、HSA或其他载体蛋白来提高稳定性但在Advanced Therapy产品开发和复杂细胞培养体系中载体蛋白可能带来额外变量、潜在免疫原性风险或下游分析干扰。Qkine SCF无需依赖载体蛋白即可保持稳定性因此更适合GMP工艺开发、细胞治疗研究和无血清培养体系等对成分明确性要求较高的场景。对于需要进行下游分析、质量属性检测或工艺放大比较的项目减少载体蛋白带来的背景干扰也有助于提高实验结果的可解释性。从蛋白结构角度看Qkine SCFQk078为18.5 kDa单体蛋白结构获得的是正确折叠、结构明确的SCF蛋白。这有助于保持稳定的生物学活性降低聚集体形成风险并提高实验重复性。目前市场上已经有较多SCF产品但随着CAR-T、CAR-NK、iPSC治疗、HSC基因编辑和再生医学的快速发展研究人员关注重点已经从“有没有SCF”转向“SCF是否足够稳定、足够纯、足够一致”。Qkine SCFQk078正是围绕这一需求开发的高纯度、高活性、高一致性、无动物源、无载体蛋白SCF产品可用于细胞治疗开发相关研究场景。Qkine SCFQk078基本信息与技术数据Qkine SCFQk078为高纯度人SCF蛋白Uniprot编号为P21583蛋白大小为18.5 kDa单体。根据资料显示该蛋白通过SDS-PAGE定量密度测定法测定纯度98%在大肠杆菌中表达不含动物源性成分AOF和载体蛋白由位于英国剑桥的实验室制造并由乙腈和C₂HF₃O₂冻干而成。重悬时可将溶液重悬于无菌过滤水中浓度50 μg/mL如有需要可添加载体蛋白制备一次性使用的等分试样并冷冻保存于-20°C短期或-80°C长期。其其他名称包括Mast cell growth factorMGF、Stem cell growth factorSCF、C-kit ligand和Qk78物种反应性为humanspecies similarity包括mouse 79%、rat 79%、bovine 82%、porcine 83%。图1. Qkine SCFQk078在相关产品方面Qkine资料中还涉及mouse SCF proteinQk077、human SCF proteinQk078-CTG、Microglial differentiation kitQk519、human IL-2Qk089、human IL-6Qk093、human IL-7Qk095、human Flt3LQk087、human IL-8 proteinQk119、human TPO proteinQk098、human EPO proteinQk099和human IL-34 PLUS proteinQk091等。对于CGT研发和干细胞培养体系而言这类细胞因子常常不是单独使用而是需要根据不同细胞类型、培养阶段和分化方向进行组合。因此在选择SCF时也需要结合整体培养体系和其他细胞因子组合进行验证。质控数据方面Qkine SCFQk078质谱分析显示为具有预期质量的单一物种从原液瓶中回收率95%内毒素0.05 EU/μg蛋白。生物活性方面资料中采用Promega血清反应元件荧光素酶报告基因检测法在共转染c-Kit的HEK293T细胞中测定重组SCF活性数据来自Qk078批号204804EC50 12.4 ng/mL0.67 nM。这类活性数据有助于研究人员从功能角度理解SCF的有效性而不仅仅停留在蛋白浓度或纯度参数上。图2. Qkine SCFQk078的生物活性纯度检测方面重组SCF在还原R条件下迁移至约18 kDa单体在非还原NR条件下迁移至约15 kDa未检测到污染蛋白条带。纯化的重组蛋白3 μg在还原β-巯基乙醇R和非还原NR条件下经15%w/vSDS-PAGE电泳分离并用考马斯亮蓝R250染色。相关数据来自Qk078批号204621。对于细胞治疗和干细胞培养研究而言SDS-PAGE纯度数据可以帮助判断样品中是否存在明显污染蛋白条带也有助于比较不同批次或不同来源产品的质量稳定性。图3. Qkine SCFQk078的纯度在与其他供应商产品的活性对比中Qkine SCF与另一家主要供应商的SCF具有相近的生物活性。重组SCF活性通过TF-1人髓系白血病细胞增殖实验测定细胞用SCF进行系列稀释处理48小时每个处理设置三个复孔细胞活力采用CellTiter-GloPromega发光法测定。数据来自Qk078批号204613其中EC50 Qk0782.86 ng/mL154 pM供应商B3.05 ng/mL166 pM。这类对比数据对于研究人员评估不同来源SCF在功能表现上的一致性具有参考价值。图4. Qkine SCFQk078与其他供应商的活性对比Qkine SCFQk078已发表的典型文献Qkine SCFQk078已在部分研究文献中出现例如Azami T、Theeuwes B、Ton M-LN等发表的“STAT3 signalling enhances tissue expansion during postimplantation mouse development”DOI为10.1016/j.celrep.2025.115506。另一个例子是Moullet M、Isobe T、Vahidi A等的“Self-supervised learning for a gene program-centric view of cell states”DOI为doi.org/10.64898/2026.03.24.713961。对于科研用户而言已发表应用案例可以作为了解产品在不同研究体系中使用情况的参考但具体实验条件仍需根据细胞类型、培养体系和研究目标进行验证。SCF常见问题从定义到细胞培养应用SCF是一种蛋白质生长因子对干细胞维持和分化具有重要作用其中包括骨髓微环境中的造血干细胞。它存在于骨髓、皮肤、胃肠道、生殖器官和神经系统中可由成纤维细胞、内皮细胞、基质细胞和上皮细胞产生用于维持组织稳态并调节造血、黑色素生成和免疫反应等细胞过程。SCF被归类为细胞因子因为它是一种在细胞信号传导和免疫反应中发挥关键作用的小蛋白。SCF主要与c-kit结合c-kit又称酪氨酸蛋白激酶kit或CD117。C-kit是一种受体酪氨酸激酶表达于造血干细胞、肥大细胞、黑素细胞、生殖细胞和间质细胞表面。SCF与c-kit结合后会触发细胞内信号级联反应从而调节细胞存活、增殖和分化因此SCF/c-kit信号通路在干细胞功能调控和细胞培养体系中具有重要意义。在细胞培养中SCF通常作为补充剂添加到细胞培养基中为干细胞存活、增殖和分化提供必要信号。它作为一种生长因子可以激活调节干细胞功能关键细胞过程的信号通路因此常用于HSC扩增、免疫细胞培养、iPSC分化和CGT相关工艺开发。SCF/c-kit信号通路背景与参考资料干细胞因子SCF又称kit配体或肥大细胞生长因子是干细胞功能中的关键蛋白其作用涵盖从胚胎发育到组织再生和癌症生物学等多个层面[1]。SCF主要通过与其受体c-kit相互作用发挥作用。c-kit是一种跨膜酪氨酸激酶受体表达于多种细胞类型表面包括造血干细胞、神经嵴衍生细胞、黑色素细胞和生殖细胞。SCF与c-kit结合后会触发一系列细胞内信号通路例如Ras/MAPK、PI3K/Akt和JAK/STAT通路这些通路调控细胞增殖、存活、迁移和分化[2,3]。干细胞因子SCF是其受体c-Kit的关键配体结合后可启动信号级联反应。SCF也可在细胞膜附近通过蛋白水解切割转化为可溶性形式这种切割会将SCF的胞外结构域释放到细胞外空间生成可溶性SCF。尽管经过这种修饰可溶性SCF仍保留与c-Kit结合并激活下游信号通路的能力。可溶性SCF可作为旁分泌或自分泌因子发挥作用对邻近细胞或产生它的同一细胞产生影响[3,4]。SCF的关键作用之一是在造血过程中维持和扩增造血干细胞。SCF在骨髓微环境中对HSC的维持和扩增具有重要作用[5,6]它不仅促进HSC自我更新也参与促进其分化为多种血细胞谱系包括红细胞、肥大细胞和血小板[4]。干细胞因子在胚胎发育中也具有重要作用参与各种组织和器官形成。在胚胎发生过程中SCF参与神经嵴细胞的增殖、迁移和存活而这些细胞可进一步分化为神经元、胶质细胞、黑色素细胞和平滑肌细胞等多种细胞类型[7]。除了正常生理功能外SCF信号通路失调还与多种病理状态相关包括癌症[8]。在某些类型的癌症中例如胃肠道间质瘤GIST、急性髓系白血病AML和黑色素瘤均观察到SCF/c-kit通路异常激活。在这些恶性肿瘤中c-kit基因突变或SCF过度表达可能导致细胞增殖、存活和转移失控因此SCF/c-kit轴也成为癌症研究和治疗开发中的一个重要靶点方向[9]。需要注意的是在细胞培养和工艺开发语境中SCF更多是作为细胞因子补充剂和信号调控工具进行应用具体作用仍需结合细胞类型、培养条件和实验目标进行判断。小结在CGT研发、HSC扩增、iPSC分化、免疫细胞培养和无血清培养体系中SCF的选择会直接影响培养体系稳定性和实验重复性。对于这类应用而言研究人员不应只关注SCF是否可用或标称浓度是否一致还应关注其生物活性、纯度、批次一致性、无动物源属性、载体蛋白情况、内毒素水平、结构状态和质控数据。Qkine SCFQk078围绕高纯度、高活性、高一致性、无动物源和无载体蛋白等特点进行设计为细胞治疗相关研究和干细胞培养体系提供了一种可参考的SCF选择方向。如果将SCF放在完整细胞培养体系中理解它不仅是一个单独添加的生长因子更是影响细胞存活、增殖、分化和工艺放大的关键变量。随着CAR-T、CAR-NK、iPSC治疗、HSC基因编辑和再生医学相关研究持续推进SCF这类基础细胞因子的质量控制要求也会不断提高。因此在搭建细胞培养或CGT工艺开发体系时将SCF质量参数纳入原材料筛选和工艺验证流程有助于提高后续实验结果的稳定性和可解释性。FAQ1. 什么是干细胞因子SCFSCF是一种蛋白质生长因子对干细胞的维持和分化具有重要意义包括骨髓微环境中的造血干细胞。它可以通过与c-kit受体结合参与调节细胞存活、增殖和分化是干细胞培养和细胞治疗相关研究中常见的细胞因子之一。2. SCF在哪里可以找到SCF存在于骨髓、皮肤、胃肠道、生殖器官和神经系统中。它由成纤维细胞、内皮细胞、基质细胞和上皮细胞产生可参与维持组织稳态并调节造血、黑色素生成和免疫反应等细胞过程。3. SCF是细胞因子吗是的SCF被归类为细胞因子因为它是一种在细胞信号传导和免疫反应中发挥关键作用的小蛋白。在细胞培养中SCF常作为培养基补充成分使用为特定细胞类型的存活、扩增和分化提供信号支持。4. SCF与什么结合SCF与c-kit结合c-kit又称酪氨酸蛋白激酶kit或CD117。C-kit是一种受体酪氨酸激酶表达于造血干细胞、肥大细胞、黑素细胞、生殖细胞和间质细胞表面。5. SCF受体的功能是什么SCF与c-kit结合后会触发细胞内信号级联反应从而调节细胞存活、增殖和分化。这一过程对于造血干细胞维持、部分免疫细胞培养和干细胞相关研究具有重要意义。6. SCF通路是什么SCF通路通常指SCF/c-kit信号通路。SCF与c-kit结合后可激活下游信号级联反应并进一步参与调控细胞增殖、迁移、存活和分化等过程。7. SCF在细胞培养中是如何应用的SCF通常作为补充剂添加到细胞培养基中为干细胞的存活、增殖和分化提供必需信号。它作为一种生长因子可刺激并激活调节干细胞功能的关键细胞过程因此常用于HSC扩增、iPSC分化、免疫细胞培养和CGT相关工艺开发。背景参考资料[1] Huang EJ, Nocka KH, Buck J, Besmer P. Differential expression and processing of two cell associated forms of the kit-ligand: KL-1 and KL-2. Mol Biol Cell. 1992;3(3):349-362.[2] Lennartsson J, Rönnstrand L. Stem cell factor receptor/c-Kit: from basic science to clinical implications. Physiol Rev. 2012;92(4):1619-1649.[3] Yuzawa S, Opatowsky Y, Zhang Z, Mandiyan V, Lax I, Schlessinger J. Structural basis for activation of the receptor tyrosine kinase KIT by stem cell factor. Cell. 2007;130(2):323-334. doi: 10.1016/j.cell.2007.05.055[4] Huang EJ, Nocka KH, Buck J, Besmer P. Differential expression and processing of two cell associated forms of the kit-ligand: KL-1 and KL-2. Mol Biol Cell. 1992;3(3):349-362. doi:10.1091/mbc.3.3.349[5] Blume-Jensen P, Janknecht R, Hunter T. The kit receptor promotes cell survival via activation of PI 3-kinase and subsequent Akt-mediated phosphorylation of Bad on Ser136. Curr Biol. 1998;8(13):779-782.[6] Zsebo KM, Williams DA, Geissler EN, et al. Stem cell factor is encoded at the Sl locus of the mouse and is the ligand for the c-kit tyrosine kinase receptor. Cell. 1990;63(1):213-224.[7] Waskow C, Madan V, Bartels S, et al. Hematopoietic stem cell transplantation without irradiation. Nat Methods. 2009;6(4):267-269.[8] Hu Y, Smyth GK. 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