免纯化 MST 微量热泳动技术带你轻松拿下多种分子互作检测艾普蒂生物一站式分子互作实验服务01.免纯化 MST 技术简介在生物分子相互作用研究中不少科研人员常会遇到难题目标蛋白表达纯化难度大或是纯化后在标记过程中失活导致分子互作实验难以开展。膜蛋白、低丰度蛋白、稳定性差的蛋白更是实验路上的阻碍。微量热泳动Microscale ThermophoresisMST技术可有效解决以上问题。技术原理MST 依托热泳动物理现象红外激光照射样品形成微观温度梯度场荧光标记的靶分子会从高温区向低温区移动。当靶分子与配体结合后分子尺寸、水化层、表面电荷等理化性质发生改变热泳动行为也随之变化。设备通过检测荧光强度变化监测分子热泳动差异进而定量计算分子结合亲和力Kd 值。传统 MST 虽优势突出无需固定、样品用量少、适用场景广可直接在细胞裂解液、血清等复杂样品中检测但仍依赖高纯度蛋白。免纯化 MST 技术进一步突破限制将目的蛋白与 GFP 等荧光蛋白融合在细胞内瞬时表达后直接制备细胞裂解液即可上机检测全程无需蛋白纯化专为难表达、难纯化、稳定性差的蛋白研究设计。02.免纯化 MST 技术基本流程以 HEK293T 细胞瞬时表达体系为例流程简单易操作载体构建将目的蛋白基因与 GFP 标签融合构建真核表达载体。细胞转染与表达把质粒转染至 HEK293T 细胞培养 48–72 h保证目的蛋白充分表达。裂解液制备与 MST 实验收集细胞并裂解取上清液直接开展 MST 检测无纯化步骤。整套流程耗时短从细胞转染到获取亲和力数据仅需数天大幅节约时间与实验成本。03.MST 的多样化应用场景MST 适配绝大多数生物分子互作检测覆盖蛋白、小分子、核酸、多肽、脂质体、纳米颗粒等典型应用如下蛋白与小分子亲和力分析适用于药物研发、信号通路研究。全程溶液自由态检测无需固定蛋白避免蛋白构象改变、结合位点被遮蔽等问题。蛋白与多肽相互作用针对细胞信号传导相关研究样品消耗量低可定量分析二者结合亲和力。蛋白与蛋白结合动力学抗原 - 抗体、分子伴侣 - 底物等互作均可检测双分子均处于自由溶液状态更贴近生理环境适配构象敏感、稳定性弱的蛋白。蛋白与核酸DNA/RNA结合检测应用于基因表达调控研究无需固定、特殊处理核酸实验流程简洁。蛋白与脂质体、纳米颗粒互作分析适配药物递送系统、纳米生物材料研究可处理大尺寸样品实现精准亲和力定量。难表达、难纯化蛋白互作筛选专门解决膜蛋白、低丰度蛋白、易降解蛋白的实验难题依托细胞裂解液直接检测省去繁琐纯化流程。该技术广泛应用于基础科研、药物靶点验证、候选药物筛选、疾病标志物筛查、生物材料开发等领域。艾普蒂生物深耕分子互作领域多年为您提供从蛋白表达纯化到微流控热泳动MST检测的一站式解决方案让您无需在多个平台之间奔波一次对接、全程托管、省心省力。04MST 技术核心优势一览对比传统分子互作检测技术MST 优势显著1.无需固定溶液中自由检测杜绝固定造成的蛋白构象改变规避假阳性、假阴性结果。2.样品消耗极少单次检测仅需数微升样品测定 Kd 值仅需纳克级样品适配珍稀样品。3.适用范围极广可在细胞裂解液、血清、含去垢剂等复杂体系中直接检测不受分子类型、溶液成分限制。4.快速高效单次完整检测仅需约 10 分钟实验效率高。5.无需纯化免纯化方案打破传统实验壁垒难纯化蛋白也可顺利开展互作实验。一站式 MST 分子互作服务艾普蒂生物艾普蒂生物深耕分子互作领域提供从蛋白表达纯化到 MST 检测全流程一站式服务全程托管省心省力。服务亮点多系统蛋白表达与纯化拥有大肠杆菌、HEK293 细胞、CHO 细胞、昆虫细胞杆状病毒表达系统等多种表达体系根据蛋白特性定制表达方案提供高纯度、高活性目的蛋白。专业 MST 微量热泳动检测搭载 Monolith 系列 MST 分子互作仪支持常规 MST、免纯化 MST 两种模式精准测定各类分子结合亲和力Kd 值数据专业可靠。海量蛋白资源储备 6 万 种蛋白库存常用靶点蛋白可直接调用缩短项目周期。丰富实战经验5 年行业经验累计完成 3000 靶点检测服务 2000 科研客户技术成熟。全流程闭环服务涵盖基因合成、载体构建、蛋白表达纯化、MST 实验设计、数据分析实现 “样品进→数据出” 一体化服务。服务覆盖场景蛋白与小分子亲和力分析蛋白与多肽相互作用检测蛋白与蛋白结合动力学分析蛋白与 DNA/RNA 结合检测蛋白与脂质体、纳米颗粒互作分析难表达、难纯化蛋白互作筛选免纯化 MST细胞裂解液直接检测总结MST 核心优势无需固定、无需纯化后修饰、样品纳克级消耗、适配复杂体系、检测快速10 分钟内出结果。合作咨询无论你是在校科研人员还是行业研发人员我们均可提供标准化检测或定制化实验方案。如有实验需求欢迎私信沟通量身打造最优解决方案助力科研项目推进#生物#实验室日常#分子互作#蛋白互作#MST#蛋白纯化#科研#科研日常#重组蛋白