据世界卫生组织WHO介绍本轮由本迪布焦型埃博拉病毒引发的疫情感染人数已破千。埃博拉病毒EBOV属于包膜负链RNA病毒编码7种结构蛋白可造成人类和非人灵长类动物发生重症出血热病死率较高。研究证实基质蛋白VP40是成熟病毒颗粒中表达量和丰度最高的蛋白质在EBOV病毒出芽、结构维持方面具有重要作用。义翘神州作为全球病毒科研试剂供应商已成功构建涵盖1500多种抗原、100病毒类型/亚型的6000多种试剂的ProVir®病毒研究库能够协助研究者快速应对突发疫情。目前可现货供应30多种重组抗原和40多种抗体产品包括Bundibugyo、Zaire、Sudan等毒株的GP、NP、VP科研试剂。01 VP40的结构特征与生物学功能埃博拉病毒有7种结构蛋白分别为膜糖蛋白GP、核蛋白NP、VP30、VP35、基质蛋白VP40、VP24及聚合酶L。糖蛋白GP介导病毒入侵宿主细胞可被宿主免疫系统识别是大多数疫苗和药物研发的核心靶点。核蛋白NP、VP30、VP35和聚合酶L共同构成病毒核衣壳负责病毒转录和复制。次要基质蛋白VP24具有抗干扰素、调控感染过程的作用。主要基质蛋白VP40属于外周膜蛋白全长326个氨基酸由柔性连接区相连N端结构域NTD与C端结构域CTD。N端负责VP40的二聚化和寡聚化C段介导膜结合作用。多项研究证实VP40结合细胞膜需要这两个结构域共同参与。VP40的潜在药物靶点及其二聚体结构源自文献doi: 10.2217/fvl.15.6VP40的主要生物学功能是负责病毒包膜组装和出芽。VP40首先在细胞质内通过N段结构域的相互作用形成蝴蝶状二聚体。二聚体到达细胞膜内侧单层膜后其C段疏水区域如L213、L295、V298嵌入膜内带正电的碱性赖氨酸区域K221、K224等和膜内阴离子脂质发生静电作用使VP40寡聚化成锯齿状的线性六聚体。VP40 N端的出芽结构域还能招募宿主细胞的ESCRT系统蛋白如泛素连接酶切断细胞膜释放病毒颗粒。不同状态的VP40寡聚体具有不同的生物学意义。六聚体负责病毒组装与出芽而八聚体参与病毒转录调控防止病毒在尚未组装前过度转录。六聚体与八聚体的结构和功能是相互独立的其一一对应的关系还需要更多研究证实。VP40寡聚化受分子间相互作用及蛋白与细胞膜相互作用共同调控不同寡聚体参与病毒生命周期的不同阶段。因此设计抑制或改变寡聚体生成的小分子化合物有望成为有效的抗病毒药物。VP40还介导宿主病理损伤激活NF-κB炎症信号通路诱发细胞因子风暴。受感染的细胞通过外泌体释放VP40进入未感染的免疫细胞后会诱导髓系细胞和T细胞大量凋亡导致患者出现严重的免疫抑制、凝血紊乱、淋巴细胞耗竭等症状。02 VP40的多维度应用场景随着对VP40在维持病毒丝状形态、介导病毒组装、出芽及调控复制转录等方面分子机制研究的深入其已成为抗病毒药物研发、新一代疫苗开发和早期诊断试剂开发的关键靶点蛋白。VP40可构建在低级别安全实验室进行研究的病毒模型。其在哺乳动物细胞中可自主组装成无感染性的病毒样颗粒VLP实现在BSL-2级实验室模拟病毒的组装、出芽等机制不受活病毒BSL-4级实验室的限制。VP40通过多种方式抑制宿主先天免疫是研究病毒-宿主相互作用的重要工具。VP40还是抗病毒药物和新一代疫苗研发的重要靶点。通过小分子抑制剂阻断VP40的二聚化、六聚化或八聚化的转换破坏病毒组装或转录调控。靶向阻断VP40与宿主受体蛋白Need4或细胞膜脂质的相互作用抑制病毒出芽。以重组VP40蛋白为骨架与具有强免疫原性的糖蛋白GP共同表达可制备出高度模拟天然病毒抗原表位的VLP疫苗。研究发现这类疫苗安全性较高在动物模型中可诱导产生中和抗体和T细胞免疫应答。VP40蛋白在感染早期通过病毒结合态、游离态及外泌体形式释放至患者体液中表达丰度高同一血清型病毒的序列保守性好是开发诊断试剂的重要靶点。基于双抗体夹心法开发的胶体金或荧光免疫层析试纸。可在不依赖复杂检测仪器的情况下在15-30分钟内快速筛查出阳性患者提高病毒体外检测的时效性。义翘神州通过胶体金层析LFA技术筛选出灵敏度达到1 ng/mL的泛EBPV VP40抗体对40447-MM02和40447-T62。03 VP40蛋白在研究中的应用案例1基础研究揭示宿主细胞内质网自噬ER-phagy限制病毒复制的分子机制中美联合研究团队在bioRxiv预印本发表其新研究进展发现RETR1-2能够靶向降解埃博拉病毒糖蛋白GP广泛抑制多种毒株的复制。而VP40通过与RETR1-2的C端结合选择性地将其降解恢复GP的表达和病毒入侵同样RETR1-2也能通过类似的机制降解VP40说明宿主与病毒之间存在复杂的双向拮抗作用。本研究中义翘神州的抗EBOV-VP40兔多克隆抗体货号40446-T48表现出良好的灵敏度和特异性。将其作为一抗用于免疫印迹WB实验实现了对细胞裂解物及纯化VLP颗粒中VP40蛋白表达量的定性和定量检测还用于免疫共沉淀Co-IP实验分析宿主与病毒蛋白的动态拮抗作用。VP40重组蛋白用于WB实验源自文献doi: 10.64898/2026.04.01.7158982重症幸存者体液免疫应答的纵向动态监测美国FDA的研究人员对一名接受支持性治疗的重症EBOV病毒幸存者进行了全面的体液免疫应答分析以揭示自然恢复过程中的病毒作用机制。并通过全基因组片段噬菌体展示文库GFPDL技术成功鉴定了GP蛋白上的多个免疫位点为设计更长效的肽段疫苗或组合疫苗提供数据依据。研究团队将购自义翘神州的扎伊尔埃博拉病毒VP40重组蛋白货号40446-V07E用于SPR芯片定量检测血清样本中抗VP40抗体的结合滴度变化以及解离速率。3利用SPR技术筛选可用于快速诊断的抗体对美国海军研究实验室的团队在开发高灵敏度、高特异性EBOV快速诊断试剂的项目中将义翘神州的VP40重组蛋白货号40446-V10E作为重要的靶抗原固定在SPR的GLC传感器芯片通道上测定单抗和自制单域抗体的抗体亲和力与动力学。实验过程选用了两款商业化的VP40蛋白结果发现义翘神州的重组蛋白具有更好的结构稳定性和耐受性。在经历多次酸性条件再生或跨天重复使用后不会发生变性与抗体仍有稳定的结合活性能够支持高通量抗体筛选。✦义翘神州病毒研究方案助力埃博拉病毒研究和防控义翘神州提供相关重组蛋白、抗体和基因产品涵盖Zaire、Sudan、Bundibugyo不同毒株的GP、NP、VP关键靶点。其中GP蛋白可用于受体结合研究、抗体筛选、疫苗抗原评价和血清学检测。NP蛋白可用于诊断抗原开发、抗体检测和免疫反应研究。VP40作为基质蛋白与病毒装配和出芽过程密切相关可用于病毒样颗粒和结构功能研究。【参考文献】1. Jonathan J Madara, et al. The multifunctional Ebola virus VP40 matrix protein is a promising therapeutic target. Future Virol. 2015 doi:10.2217/fvl.15.62. Bin Wang, et al. Protein disulfide isomerases (PDIs) negatively regulate ebolavirus structural glycoprotein expression in the endoplasmic reticulum (ER) via the autophagy-lysosomal pathway. https://doi.org/10.1080/15548627.2022.20313813. Jing Zhang, et al. FAM134B isoform 2/RETREG1-2 defines a calnexin-TOLLIP-coupled ER-phagy pathway that restricts Ebola virus glycoprotein and is antagonized by VP40 through macro-autophagy. bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.64898/2026.04.01.7158984. Khurana et al. Longitudinal Human Antibody Repertoire against Complete Viral Proteome from Ebola Virus Survivor Reveals Protective Sites for Vaccine Design. Cell Host Microbe, 2020. https://doi.org/10.1016/j.chom.2020.01.0015. George, et al. Label free checkerboard assay to determine overlapping epitopes of Ebola virus VP-40 antibodies using surface plasmon resonance. Journal of Immunological Methods, 2017. http://dx.doi.org/10.1016/j.jim.2017.01.0056. Shu Q, et al. Species-specific quantification of circulating ebolavirus burden using VP40-derived peptide variants. PLoS Pathog 2021. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010039