在当前的化学生物学研究中药物靶标鉴定 (Target Identification) 是连接表型发现与机制解析的桥梁。传统的亲和色谱法等技术通常依赖于药物分子的共价标记或探针修饰。然而对于许多结构精密的活性分子尤其是从植物中提取的天然产物任何细微的结构变动都可能导致药效丧失。因此以 DARTS (药物亲和响应靶标稳定性) 为代表的非标记 (Label-free) 技术正逐渐成为行业的主流选择。DARTS 技术之所以被视为“经典”源于其对药物分子天然态的尊重。该技术不需要在药物分子上偶联生物素或荧光基团这意味着实验可以在完全不改变药物药效团的前提下进行。对于制药企业和基础科研团队来说这极大地缩短了前期准备周期避免了繁杂的化学合成步骤。实验直接使用市售的或提取获得的原型化合物与细胞裂解液中的天然蛋白在接近生理的温和条件下如使用温和的 IP 裂解液进行结合。在靶点筛选的灵敏度与准确性方面DARTS 结合现代质谱技术表现出了极佳的性能。达吉特等在 DARTS 实验中通常会进行动态酶浓度的摸索针对不同的生物样本设置最适实验条件以确保鉴定结果的准确。实验中药物结合蛋白后若表现出对蛋白酶的耐受性增强即 FC 1.2则被视为上调蛋白是潜在的直接结合靶标。通过这种逻辑研究者可以从数千种蛋白中精准过滤掉非特异性结合的干扰项。天然产物领域是 DARTS 技术的应用高地。许多珍稀的天然活性单体其靶标往往是不易捕捉的低丰度蛋白或酶类。DARTS 能够通过增强蛋白稳定性这一物理化学现象将原本易被降解的靶标蛋白在电泳胶上“固化”下来进而通过质谱鉴定。例如研究人员在筛选抗肿瘤药物时利用 DARTS 发现了一种单体化合物能够与代谢酶 DCTPP1 直接结合并抑制其活性从而干扰肿瘤细胞的氨基酸代谢。针对中药复方这类更为复杂的生物体系DARTS 技术的无标记优势更加显著。复方中的多成分协同作用是中医理论的核心但也给靶点研究带来了巨大挑战。DARTS 技术无需对复方中的每一个成分进行修饰而是直接将复方提取液与靶标细胞裂解液孵育在“黑箱”体系中寻找那些被复方成分集体或特定成分保护的蛋白。虽然复方的后续验证如 SPR存在一定困难但通过 DARTS 初筛后再结合成分分析可以有效锁定关键活性物质及其作用的靶标蛋白。达吉特DARTS技术服务文献[1]. Zhang W, Song Y, Li C, et al. Canagliflozin Alleviates Diabetic Glomerular Endothelial Injury via Melibiose in a Microbiota-Dependent Manner. Adv Sci (Weinh). Published online May 27, 2026. doi:10.1002/advs.202517222.郑州大学第一附属医院IF14.1[2]. Liang Y, Zhang YL, Cheng TY, et al. Senkyunolide H potentiates bone marrow-derived mesenchymal stem cells therapy for liver cirrhosis by targeting MAEA to enhance ERK-driven HGF secretion. Pharmacol Res. 2026;226:108160. doi:10.1016/j.phrs.2026.108160.上海中医药大学IF10.5[3]. Zhang S, Tang L, Pu Y, et al. Patchouli alcohol triggers autophagic cell death in non-small cell lung cancer cells through targeting GNAI1 to dissociate the GNAI1/ARRB1 complex. Int J Biol Sci. 2026;22(8):4004-4024. Published 2026 Mar 30. doi:10.7150/ijbs.125690.中国上海市宝山区吴淞中心医院IF10[4]. Yang X, Lin G, Chen Y, et al. Chlorquinaldol Alleviates Lung Fibrosis in Mice by Inhibiting Fibroblast Activation through Targeting Methionine Synthase Reductase. ACS Cent Sci. 2024;10(9):1789-1802. Published 2024 Aug 28. doi:10.1021/acscentsci.4c00798.广州医科大学IF12.7